Продукция

Орбиталь фибробластларның җитлеккән адипоцитларга дифференциациясе һәм соңрак адипоза тукымасының туплануы каберләр орбитопатиясе (GO) барышында күрсәтелде.Автофаг адипогенезда катнаша, ләкин GO инициативасында һәм алгарышында автофагның роле турында аз билгеле.Бу тикшерүнең максаты - автофагның GO патогенезындагы ролен тикшерү. Орбиталь адипоза / тоташтыргыч тукымалар GO белән авыручылардан һәм гадәти предметлардан, шулай ук ​​орбиталы фибробластлар анализланган.Адипогенез водород пероксиды белән яки дифференциацияләү чарасы ярдәмендә ясалган, һәм автофаги бафиломицин A1 һәм Atg5 максатлы кыска чәчле РНК (shRNA) ярдәмендә кулланылган.Автофагосомалар электрон микроскопия белән ачыкланган.Автофаг белән бәйле геннарны һәм адипогенез белән бәйле транскрипция факторларын чагылдыру реаль вакытта кире транскрипция-полимераз чылбыр реакциясе һәм / яки Көнбатыш блот анализы белән анализланды.Липид тамчыларын туплау Нефть Кызыл О буяу белән тикшерелде. Автофагик вакуоллар GO күзәнәкләрендә GO булмаган күзәнәкләргә караганда күбрәк иде (p <0.05).Автофаги белән бәйле геннарның чагылышы GO тукымаларында һәм күзәнәкләрендә, аларның GO булмаган хезмәттәшләренә караганда, зуррак булган.Интерлеукин-1β GO күзәнәкләрендә LC3-II, p62 һәм Atg7 протеинын арттырды.Автофагосома туплануы адипогенезның 4-нче көнендә күрсәтелде һәм липид тамчылары барлыкка килү белән бергә 10-нчы көнгә кимеде.LC3 һәм p62 аксымнарын чагылдыру дифференциациядән 48 сәгать эчендә артты һәм 4 көннән алып 10 көннән әкренләп кимеде. Bafilomycin A1 дәвалау һәм ShRNA тарафыннан Atg5 сугылу липид тамчыларының туплануын һәм адипогеник маркерларның кысылуын тыя. Автофагия GO тукымаларында һәм күзәнәкләрендә чагыштырганда арткан GO булмаган тукымалар һәм күзәнәкләр, автофагның GO патогенезында роль уйнавын күрсәтәләр.Автофаг манипуляциясе GO өчен терапевтик максат булырга мөмкин.