Продукция

LecA (PA-IL) - цитотоксик лектин һәм Псевдоном аэругинозасы җитештергән ябыштыргыч, ул гидрофобик галактозидларны югары үзенчәлек һәм якынлык белән бәйли.LecA-egfp тәрҗемә кушылуы һәм биофильмнан тыш күзәнәк матрицасына иммуноблот анализы кулланып, без lecAның биофильмда үскән күзәнәкләрдә чагылыш тапканын күрсәтәбез.Полистиролда да, пасовкасыз корычта да статик биофильм анализларында, биофильм тирәнлеге һәм өслекне каплау lecA мутациясе белән кимеде һәм LecA-артык җитештерүче PAO-P47 штаммында көчәйтелде.Биофильм өслеген ата-аналар штаммы белән каплау, PAO-P47, ләкин корыч купоннардагы lecA мутанты түгел, шулай ук ​​изопропил-бета-Д-тиогалактозид (IPTG) яки p-nitrophenyl-alfa-D-галактозид (). NPG).Моннан тыш, бу гидрофобик галактозидлар булмаганда барлыкка килгән кыргый типтагы биофильмнар IPTG кушылуы белән таралырга мөмкин.Киресенчә, P. aeruginosa LecB (PA-IIL) лекциясенә бик якын булган p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) кушылу биофильм формалашуга яки таралуга бернинди тәэсир итмәде.П аэругиноза PAO1ның планктоник үсеше IPTG, NPG яки NPF булуы белән тәэсир итмәде, һәм бу шикәрләрне углерод чыганагы итеп куллана алмады, бу биофильм формалашуга күзәтелгән эффектларның LecA-ligand конкурентлы тыюлары аркасында булуын күрсәтә. бәйләүче.Охшаш нәтиҗәләр шулай ук ​​корыч талоннарда динамик агым шартларында үскән биофильмнар өчен дә алынган, бу LecAның P. aeruginosa биофильм архитектурасына төрле экологик шартларда өлеш кертүен күрсәтә.

Альфа-Л-фукозидаз (EC 3.2.1.51) т-фукосил калдыкларын ксилоглюкан олигосакаридларының ян чылбырыннан чыгарырга сәләтле Арабидопс үсемлекләренең яфракларында ачыкланган.Моннан тыш, охшаш субстрат спецификасы булган альфа-Л-фукосидаз SDS-PAGEда бер тасма ясау өчен кәбестә (Brassica oleracea) яфракларыннан чистартылды.Бу протеин полосасыннан ике пептид эзлеклелеге алынган, һәм алар без AtFXG1 дип атарга тәкъдим иткән альфа-фукозидаз өчен Arabidopsis ген кодлаштыруны ачыклау өчен кулланылган.Моннан тыш, билгеле альфа-Л-фукозидасы булган гомологияле Арабидопс гены да табылды, һәм без аны AtFUC1 дип атарга тәкъдим иттек.AtFXG1 һәм ATFUC1 икесе дә гетерологик рәвештә Пичия пасторис күзәнәкләрендә һәм культура медиасына яшерелгән Альфа-Л-фукозидаз эшчәнлегендә күрсәтелде.AtFXG1 белән кодланган альфа-Л-фукозидаз ксилоглукан XXFG олигосакаридларына, шулай ук ​​2'-фукосил-лактитолга каршы, ләкин p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside каршы түгел.Ләкин, AtFUC1 гетерологик рәвештә 2'-фукосил-лактитолга каршы актив иде.Шулай итеп, элеккеге ксилоглюкан метаболизмы белән бәйле булырга тиеш.