Продукция

Протеин фосфориляциясе төрле кәрәзле функцияләрне көйли һәм үсемлекләрнең иртә үсешендә төп роль уйный.Арабидопс үсентеләрендәге протеин фосфориляциясен алдагы тикшерүләрне тулыландыру һәм киңәйтү өчен без альтернатив ысул кулландык, денатур булмаган шартларда протеин чыгаруны имобилизацияләнгән металл-ион якынлыгы хроматографиясе (IMAC) белән Рубиско-беткән экстрактларда фосфопротеиннарны баету, аннары идентификацияләү. ике үлчәмле гель электрофорезы (2-DE) һәм сыек хроматография-тандем масса спектрометриясен (LC-MS / MS) кулланып.Гель эчендә трипсин ашкайнату һәм сайланган гель тапларын анализлау 144 фосфориатланган пептид һәм калдыкны ачыклады, шуларның 18 фосфопептиды һәм 8 фосфозиты PhosPhAt 4.0 һәм P3DB Arabidopsis taliana фосфориляция сайты мәгълүмат базаларында табылды.Ачыкланган 82 фосфопротеинның яртысыннан күбрәге углевод матдәләр алмашында, фотосинтезда / сулышта яки оксидиатив стресска каршы механизм смсларында катнашкан.2-DE һәм LC-MS / MS алдыннан тотрыксыз фосфопротеиннарны баету фосфориатланган тронин һәм тиросин калдыкларын табуны көчәйтә, пептид дәрәҗәсен баету ысуллары белән чагыштырганда, бу ике ысулның фосфориляция мәйданын каплау ягыннан бераз тулыландырылганын күрсәтә.Яшь үсентеләр өчен нәтиҗәләрне моңа кадәр җитлеккән Арабидопис яфраклары белән чагыштырганда, бу тукымаларда дифференциаль фосфориатланган биш протеин билгеләнде, үсемлек үсеше вакытында белок фосфориляциясе динамикасын тикшерү өчен бу техниканың потенциалын күрсәттеләр.